Узнать цену

Производитель может поднять цены — запросите коммерческое предложение сейчас, и мы зафиксируем за вами текущую цену.

  • img
    Привезем под заказ
  • img
    Срок поставки с завода 6-8 недель

CRISPR Cas9-D10A Nickase Plasmid

Гарантия 1 год
Производитель:
Sigma-Aldrich
Онлайн консультант Анна Головацкая
Онлайн консультант Анна Головацкая Получить консультацию эксперта
Производитель:
Sigma-Aldrich
NACRES:NA.51

Кат. номер
CAS9D10AP-1EA
CAS9D10AP-1SET

General description
The CRISPR Cas9-D10A Nickase expression plasmids use the CMV promoter for strong transient expression of Cas9. Alternate promoters can be substituted by replacement of CMV using MluI and NheI. Also, the Cas9-D10A expression plasmids can be linearized using XbaI for T7-based mRNA production.
Application
Functional Genomics/Target Validation
  • Creation of gene knockouts in multiple cell lines
  • Complete knockout of genes not amenable to RNAi
  • Creation of knock-in cell lines with promoters, fusion tags or reporters integrated into endogenous genes

Features and Benefits
Cas9-D10A single vector can be expanded for use with any U6-guideRNA plasmids. Amounts of Cas9 and guideRNA can be altered to optimize the ratio of Cas9 to guideRNA. Recent evidence indicates off-targeting by CRISPR endonucleases is a significant concern. To address this problem, Sigma has developed paired nickase technology to expand CRISPR DNA recognition tracts to lengths similar to those of ZFNs and TALENs. Our experience suggests that paired nickases based on the Cas9-D10A mutant are most reliable. Our development work also suggests that the critical factor in producing active paired nickases is the positioning of gRNAs in a 5-to-5 orientation. For plasmid-based delivery of paired CRISPR nickases, we recommend the use of a three plasmid system comprised of the Cas9-D10A expression vector and two U6-driven gRNA vectors. To simplify the use of paired nickases, Sigma has on-line tools which allow access to a library of pre-designed paired nickases. Please check Sigmas on-line CRISPR product offerings for the latest design sets.
Components
1 vial containing 1ug of Cas9-D10A Nickase plasmid.
Please note, product does not contain guideRNA sequence. This must be purchased separately through the Custom CRISPR product tab.
Principle
CRISPR/Cas systems are employed by bacteria and archaea as a defense against invading viruses and plasmids. Recently, the type II CRISPR/Cas system from the bacterium Streptococcus pyogenes has been engineered to function in eukaryotic systems using two molecular components: a single Cas9 protein and a non-coding guide RNA (gRNA). The Cas9 endonuclease can be programmed with a single gRNA, directing a DNA double-strand break (DSB) at a desired genomic location. Similar to DSBs induced by zinc finger nucleases (ZFNs), the cell then activates endogenous DNA repair processes, either non-homologous end joining (NHEJ) or homology-directed repair (HDR), to heal the targeted DSB.
Physical form
Sigma Cas9-D10A Nickase plasmid DNA is supplied at concentrations of 20ng/ul in 50ul.
Preparation Note
Sigma CRISPR plasmid products are delivered as mini-prep aliquots, which may not be suitable for transfection into particular cell types. For best results, we advise maxi-prepping plasmids using endotoxin-free DNA purification kits prior to transfection.
Other Notes
Must be used in conjunction with two U6-gRNA plasmids in order to mediate a double strand break in the DNA.
Typical transfection concentrations used in literature are in the ranges of >= 1.0 ug/uL and <= 5 uL of Cas9-D10A plasmids combined with >= 1.0 ug/uL and <= 5 uL of U6-gRNA plasmids. (All dosages above assume 0.5 to 1 million cells nucleofected)
Legal Information
CRISPR Use License Agreement
Параметры
Quality Level200
recombinantexpressed in E. coli
packagingvial of 50 µL
concentration20 ng/µL in TE buffer; DNA (1µg of plasmid DNA)
application(s)CRISPR: suitable
PromoterPromoter name: CMV
selectionkanamycin
shipped indry ice
storage temp.20°C

Safety Information
RIDADRNONH for all modes of transport
WGK GermanyWGK 1
Flash Point FNot applicable
Flash Point CNot applicable
Пуско-наладка
Выполним распаковку, визуальную проверку, сборку и установку, запуск и настройку, проверку функциональности, проведем инструктаж персонала.
Техническое обслуживание
Проведем периодические регламентные работы: визуальный осмотр, очистка засоренных узлов и частей, замена расходных материалов и изношенных деталей, тестирование прибора, проверка показателей и измерение параметров, калибровка и настройка, обновление программного обеспечения.
IQ/OQ/PQ квалификация, валидация
Проведем монтажную (IQ), операционную (OQ) и эксплуатационную (PQ) квалификацию оборудования по протоколам производителя в полном соответствии с стандартами GMP/GLP.
Ремонт
Проведем диагностику в нашем сервисном центре или у Вас на предприятии, выявим причину поломки, устраним неисправность, проведем тестирование, настройку, калибровку отремонтированного оборудования.

Получите коммерческое предложение в течение 1 часа

Менеджер подготовит коммерческое предложение и позвонит, если понадобится уточнить детали вашего заказа

img
Анна Гловацкая Менеджер по работе с клиентами
Получите коммерческое предложение в течение 1 часа
Как к вам обращаться?
Введите телефон
Введите email
Комментарий (если есть)
Прикрепить ТЗ или заявку (до 10 мб)

С 2010 года мы поставляем оборудование с заводов Европы. Берем на себя все — от подбора оборудования до внедрения на предприятии

img
Обрудование подберут сотрудники с высшим химическим образованием

Все сотрудники имеют высшее образование, закончили ведущие химические вузы страны, такие как РХТУ им Менделеева.

img
Организуем поставку с завода- изготовителя за 6-8 недель

У большинства компаний срок ожидания составляет 10-12 недель.

img
Храним оборудование по требованиям производителя

Оборудование хранится на сухом отапливаемом складе, где поддерживается ровная температура.

img
Доставим по Москве на следующий день, по России — за 3-4 дня

Работаем с PonyExpress и Деловыми линиями. Вы также можете выбрать свою транспортную компанию или забрать товар со склада в Москве.

img
Выполним бесплатный ремонт и сервисное обслуживание

В случае любых неполадок за свой счет выполним ремонт в сервисном центре или на заводе-изготовителе. Или бесплатно заменим прибор на новый.

img
Обеспечим легкое внедрение на предприятие

Производим пуско-наладку оборудования, валидацию, обучение сотрудников. Если нужно, привлекаем инженеров с заводов- изготовителей.

Отзывы

Узнать цену

Производитель может поднять цены — запросите коммерческое предложение сейчас, и мы зафиксируем за вами текущую цену.

  • img
    Привезем под заказ
  • img
    Срок поставки с завода 6-8 недель

CRISPR Cas9-D10A Nickase Plasmid

Гарантия 1 год
Производитель:
Sigma-Aldrich
Онлайн консультант Анна Головацкая
Онлайн консультант Анна Головацкая Получить консультацию эксперта

Похожие товары: